Крио протоколы эко

Процедура ЭКО: общие положения

В зависимости от протокола, экстракорпоральное оплодотворение может включать различные процедуры, но общая схема состоит из нескольких стадий:

• Подготовка. На этом этапе пациентка консультируется с врачом-репродуктологом и проходит ряд диагностических обследований. По их результатам и данным медицинской карты женщины он назначает подходящий протокол ЭКО.
• Стимуляция яичников. Если женщина не проходит ЭКО в естественном цикле, ей назначается курс гормональных инъекций для ускоренного роста фолликулов. Это позволяет увеличить число яйцеклеток, образуемых в ее организме за один менструальный цикл, и тем самым получить больше генетического материала для оплодотворения.
• Пункция яичников и оплодотворение. Для получения ооцитов врач через влагалище прокалывает длинной иглой стенку матки и каждый из созревших фолликулов, извлекая их содержимое. Яйцеклетки передаются в лабораторию, где из них отбираются наиболее жизнеспособные и помещаются в инкубатор. Там они смешиваются с подготовленной спермой, в результате чего происходит оплодотворение.
• Перенос эмбрионов. Оплодотворенные яйцеклетки в течение 3-6 дней культивируются в инкубаторе. Как правило, перенос осуществляется по достижении эмбрионами стадии бластоцисты, которая облегчает их имплантацию в матку. Зародыши с помощью катетера переносятся в маточную полость, после чего пациентке назначается курс поддерживающей гормональной терапии и периодические обследования для установления факта беременности.

Параллельно с культивацией эмбрионов к имплантации подготавливают и эндометрий матки. Он должен достичь определенной стадии развития, при которой закрепление плодного яйца наиболее вероятно. Для этого используются гормональные препараты на основе хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) – гормона, ответственного за адаптацию репродуктивной системы женщины к беременности. Воспаления, гиперплазия, атрофия и другие патологии эндометрия существенно снижают вероятность успешного переноса. Поэтому при наличии таких заболеваний сначала проводится соответствующий курс лечения – только после него врач-репродуктолог проводит подсадку эмбрионов. 

Для оценки качества генетического материала и шансов на успешную имплантацию проводится преимплантационная генетическая диагностика. Для ПГД из эмбриона извлекаются бластомеры, образующиеся при дроблении оплодотворенной зиготы, частицы оболочки и клетки-спутники, образующиеся вскоре после начала деления. Генетический скрининг назначается по следующим показаниям:

• более 2 неудачных попыток экстракорпорального оплодотворения;
• самопроизвольные аборты и замершие беременности в анамнезе;
• возраст матери от 35 лет, отца – от 42 лет и старше;
• низкие показатели спермограммы и тяжелые нарушения сперматогенеза у партнера;
• генетические патологии у одного или обоих родителей, их ближайших родственников.

Сделайте первый шагзапишитесь на прием к врачу!

Записаться на прием к врачу

На практике преимплантационная генетическая диагностика рекомендуется всем женщинам и их половым партнерам, проходящим ЭКО. Эта диагностическая процедура позволяет выявить возможные врожденные нарушения эмбриона, снизить вероятность самопроизвольного аборта и других осложнений беременности.

Из личного опыта (отрывок):

«…Мне пришлось перенести множество попыток ЭКО: свежих, крио. Каждый раз спрашивала врачей, где делали ЭКО, какова вероятность успеха. Называли такие цифры: перенос размороженных эмбрионов – 10-12 % ( максимум 16-18% лучшие медицинские центры), 30-35% — использование свежих (40-45% — лучших мед. центры)…»

Разница вдвое между свежими и криопротоколами продолжает сохраняться. Происходит увеличение эффективности свежих циклов (до 40-45%), криопротоколов (до 20-25%). Причиной повышения результативности последних является освоение специалистами заморозки бластоцист.

Можно прочитать реальные истории, завершившиеся успехом, нужно посмотреть разделы «Наши победы». Проблемы, нюансы криопротокола — раздел «Крио», также разные топики «Клиники ЭКО».

Счастливые истории способны вселить веру, уверенность, подарить надежду. Захотите что-то рассказать другим, поделиться переживаниями, эмоциями, опытом, пишите!

В каких случаях проводится ЭКО?

Экстракорпоральное оплодотворение назначается при диагностировании у одного или обоих родителей бесплодия. Под этим термином подразумевается неспособность семейной пары зачать естественным образом в течении 12 месяцев при ведении активной половой жизни без использования средств контрацепции. Заболевания, провоцирующие бесплодие, можно разделить на несколько категорий:

• Анатомические аномалии — врожденные или приобретенные (вследствие травм, воспалительных заболеваний, хирургического вмешательства) нарушения строения половых органов, такие как непроходимость или отсутствие маточных труб у женщин и семенных канальцев у мужчин, рубцы и спайки в матке;
• Эндокринные (гормональные) патологии — нарушения выработки гормонов, развивающиеся из-за заболеваний яичников у женщин или семенных желез у мужчин, щитовидной железы, надпочечников, а также других органов, не выполняющих секреторную функцию (печени, почек, ЖКТ и т. д.);
• Психические нарушения – сильные эмоциональные переживания, депрессия, шизофрения и другие психопатологии могут вызвать нарушения гормонального фона, провоцировать отторжение эмбрионов;
• Эндометриоз – аномальное разрастание эндометрия (слоя, выстилающего поверхность матки) и связанные с ним спаечные процессы;
• Иммунные аномалии – патологии, вызываемые реакцией женского организма на мужскую сперму, аутоиммунные заболевания мужчины, при котором собственная защитная система стерилизует сперму и т. д.;
• Сексуальные расстройства – патологии, затрудняющие или делающие невозможным естественный половой акт или зачатие, такие как эректильная дисфункция у мужчин, отсутствие или недостаточное качество спермы у мужчин, вагинизм, фригидность у женщин;
• Инфекционные заболевания – вирусы, грибки, бактерии, кишечные паразиты способны нарушить работу половых органов, вызвать общие заболевания (воспалительные, эндокринные и т. д.), затрудняющие зачатие или наступление беременности, спровоцировать слишком резкий иммунный ответ женского организма;
• Генетические нарушения – некоторые хромосомные патологии сопровождаются невозможностью зачать или выносить здорового ребенка, например синдромы Мартина-Белла, Калмана, Нунан, мускрвисцидоз и т. д.;
• Обменные нарушения – такие заболевания, как сахарный диабет, анемия, ожирение и т. д. тесно связаны с гормональными сбоями и потому являются дополнительным фактором, мешающим наступлению беременности.

Помимо этого, в медицинской практике имеются случаи психологического бесплодия. Оно развивается вследствие осознанного или неосознанного нежелания женщины беременеть, вызываемого страхом перед потерей привлекательности, болью, сопровождающей процесс вынашивания и родов и т. д. Психологическая реакция в этом случае способна вызвать физиологические последствия, мешающие зачатию – например, изменение гормонального фона, сбой в обмене веществ и т. д.

На практике бесплодие может быть спровоцировано как одной причиной, так и комплексом указанных факторов. Неспособность к нормальному зачатию выявляется как одного из родителей, так и у обоих сразу. Поэтому для определения точной причины бесплодия каждый из них проходит диагностику.

Еще одной причиной для проведения экстракорпорального оплодотворения, является отсутствие женщины постоянного полового партнера или супруга. Это может обуславливается психологическими, ценностными установки будущей матери, ее социальным положением и другими факторами. При этом физиологически она может быть абсолютно здорова физиологически. Другой, менее распространенной в нашей стране, ситуацией является желание однополой пары завести ребенка. В этом случае генетический материал для получения эмбрионов может быть взят от обоих родителей.

Подготовка к криоконсервации ооцитов

Проходить эту процедуру рекомендуется женщинам возрастом до 35 лет – выше этого предела резко возрастает количество хромосомных мутаций в яйцеклетках, что отрицательно сказывается на их качестве. Однако и пациентки, подходящие под это требование, проходят комплексное медицинское обследование, включающее:

• Анализы крови (общий, биохимический, гормональный, на наличие ВИЧ, гепатитов В и С, сифилиса);
• Анализ мочи (общий и гормональный);
• Мазки из влагалища и шейки матки для гистологического и цитологического исследований, половые инфекции;
• Ультразвуковое обследование органов малого таза и молочных желез.

Перечень диагностических процедур может быть расширен в зависимости от особенностей организма пациентки и результатов проведенных обследований. Непосредственно перед пункцией фолликулов женщине также необходимо соблюсти несколько правил:

• За 2 недели до процедуры исключить употребление кофеиносодержащих продуктов и алкоголя, а также курение;
• за 2-3дня до пункции отказаться от любой сексуальной активности (в том числе мастурбации);
• За 8 часов до забора яйцеклеток необходимо прекратить прием пищи, за 2 часа — жидкостей.

Более подробные рекомендации по подготовке к процедуре пациентке предоставит лечащий врач. Сама криоконсервация ооцитов никаких предварительных действий со стороны женщины не требует – она проводится в лабораторных условиях и не зависит от ее участия.

Виды протоколов

Пункция фолликулов и перенос эмбрионов требует лишь опыта и технических навыков, а этап стимуляции определяет качество всей дальнейшей процедуры. Поэтому во время выбора протокола врач учитывает все имеющиеся данные о пациентке и оценивает возможные риски.

Возможны три варианта: длинный, короткий протокол и естественный цикл. Последний проводится без использования гормональных препаратов. Он подходит только женщинам с собственной нормальной овуляцией.

Прием гормональных препаратов при ССО

Длинный протокол позволяет получить больше фолликулов. Такая методика назначается при миоме, кистах яичников или эндометриозе.

Короткий протокол начинается с 3–5 дня цикла и занимает около 10 дней. Специальные гормональные препараты воздействуют на яичники, стимулируя рост фолликулов. При отсутствии каких-либо нарушений на стимуляцию реагируют оба яичника, каждый из которых формирует свой доминантный фолликул.

Стоит отметить, что данная схема легко переносится женщинами, так как лекарства применяются в малых дозировках и не шокируют организм.

История криоконсервации

О сохранении биологического материала с помощью низкой температуры человек задумывался давно. Тем более, что на такую мысль наталкивает сама природа – всем известны лягушки, впадающие в ледяной анабиоз зимой и успешно оживающие после оттаивания. Учеными неоднократно делались попытки замораживания отдельных органов и даже целых живых организмов (лабораторных мышей), однако из-за несовершенства технологии результаты этих опытов были не слишком успешными.

Куда больших результатов удалось достичь в криоконсервации клеток и тканей. Уже в 1954 году было успешно проведено первое искусственное оплодотворение с использованием замороженной спермы. Однако, на тот момент использовалась несовершенная технология постепенного замораживания, из-за чего в некоторых клетках образовывались кристаллы льда, и часть из них разрушалась.

Лишь в 1983 году было проведено первое искусственное оплодотворение с использованием криоконсервированных яйцеклеток, а затем и эмбрионов. Постепенно с развитием технологий замораживания, эта процедура стала штатно использоваться для хранения генетического материала в донорских банках и центрах репродуктологии.

Технология

Криоконсервация характерна использованием жидкого азота. Его температура – около 196 градусов, позволяет затормозить жизнедеятельность клеток.

Местом хранения замороженных зародышей медицинские центры выбирают разные ёмкости, например, риопетли, криофлаконы, просто соломинки. Каждый контейнер содержит максимум 2-3 замороженных организма. Процедура осуществляется долго — 2-4 часа.

Процессу заморозки характерно применение специальных веществ – криопротекторов: сахароза, глицерин, ПР, ДМСО. Ингредиенты препятствуют образованию внутри клеток кристаллов льда, способных травмировать зародыши. Происходит это из-за выхода внутриклеточной воды, избежать этого возможно только тогда, когда среда, куда помещают человеческие клетки, содержит криопротекторы.

Содержание 40% и более позволяет замораживанию происходить быстрее. Зародыши становятся стекловидными, кристаллы льда отсутствуют. Существуют определенные неудобства метода. Необходимо размороженные эмбрионы прополоскать ледяной водой. При всех минусах, трудностях, именно технология считается наиболее перспективной.

Подготовка к процедуре ЭКО

• Отказаться от вредных привычек. Курение, употребление алкоголя и психоактивных препаратов негативно влияет на весь организм. В том числе на репродуктивную систему. В сигаретах, спиртных напитках, наркотиках содержится целый комплекс веществ, вызывающих клеточные мутации, интоксикацию и иные негативные последствия для здоровья. Даже в небольших дозах они способны нанести вред репродуктивной системе и снизить вероятность успешного зачатия. Более того, у женщин вредные привычки вызывают патологии, которые даже после наступления беременности провоцируют аномалии плода или делают невозможным вынашивание и рождение ребенка.
• Проверить вес тела. Недостаточная или избыточная масса нарушают нормальную работу как мужской, так и женской репродуктивной системы, отрицательно сказываются на качестве половых клеток. Для успешного оплодотворения необходимо контролировать индекс массы тела. Высчитать его можно, разделив вес (в кг) на квадрат роста (в м2) – допустимый интервал составляет 19-30 кг/м2. При выходе за пределы этих значений ЭКО лучше перенести до тех пор, пока индекс массы тела не вернется к нормальным значениям. Также необходимо пройти медобследование, чтобы выявить возможные эндокринные, психические и другие патологии, спровоцировавшие проблемы с весом.
• Придерживаться принципов здорового питания. Для успешного зачатия оба родителя должны получать весь комплекс питательных веществ – белки, жиры, витамины, углеводы, жирные кислоты и т. д. Поэтому перед ЭКО противопоказано соблюдение строгих и монодиет, употребление продуктов с большим количеством пищевых добавок, заменителей, растительных трансжиров. Рекомендуется включить в рацион свежие овощи и фрукты, морскую рыбу, запеченное или приготовленное на пару нежирное мясо (курицу, говядину), кисломолочные продукты.
• Принимать витаминно-минеральные комплексы. В период беременности и вынашивания плода женскому организму необходимы такие витамины, как В6 и В12, фолиевая кислота – без них возрастает вероятность развития детских патологий у плода. Также полезно увеличить потребление кальция, цинка, магния, фосфора, железа и других минералов. Точную дозировку должен назначить врач-диетолог, так как гипервитаминоз также может быть опасен для матери и ее ребенка, как и недостаток биологически-активных веществ.
• Вести активный образ жизни. Обоим будущим родителям рекомендуется увеличить физическую активность – это укрепляет организм и помогает справиться со стрессом. Однако, для женщины в период проведения ЭКО противопоказаны большие нагрузки, поэтому лучше выполнять легкие упражнения по 30-40 минут в день 3-4 раза в неделю. Хорошо подойдет легкий бег, пилатес, йога или простая прогулка на свежем воздухе.
• Сделать прививки. Некоторые бактериальные и вирусные инфекции (герпес, грипп, краснуха и т. д.) в пренатальный период способны вызвать генетические отклонения у плода. Перед ЭКО женщине необходимо пройти обследования на эти заболевания и, при отсутствии иммунитета к ним, сделать прививки. Также, при наличии хронических заболеваний, рекомендуется проконсультироваться с врачом, чтобы он скорректировал курс лечения и предложил наиболее оптимальный протокол ЭКО с учетом всех рисков для матери и ребенка.
• Ограничить сексуальную активность. Подготовка к ЭКО не оказывает значительного влияния на половую жизнь будущих родителей. Однако, им обоим стоит отказаться от всякой сексуальной активности за 3-4 дня до пункции фолликулов и в течение 7 дней после экстракорпорального оплодотворения. Это необходимо для получения достаточного количества спермы у мужчин и повышения вероятности успешного закрепления эмбриона в матке.

Полный перечень всех рекомендаций индивидуален и зависит от возраста будущих родителей, состояния их здоровья и многих других факторов. Поэтому перед процедурой ЭКО им обоим нужно проконсультироваться с врачом – только он может назначить все необходимые меры, повышающие шансы на успешное наступление беременности.

Размораживание ооцитов

Возвращение замороженных ооцитов к нормальному состоянию для последующей пересадки происходит постепенно. Врач медленно понижает концентрацию криопротектора в клетках, вытесняя его водой. После того, как ооциты достигают температуры тела, их оплодотворяют спермой донора или супруга пациентки. Полученные эмбрионы 3-5 дней содержатся в инкубаторе, где развиваются до стадии начального дробления или бластоцисты и пересаживаются пациентке.

Размораживание, выполненное с соблюдением правильной технологии, не наносит никакого вреда клеткам и не снижает их фертильность. Напротив, по некоторым исследованиям вероятность наступления беременности при ЭКО с использованием размороженного материала на 15% выше, чем с применением «свежих» клеток. Это объясняется тем, что при криоконсервации ооцитов проводятся дополнительные исследования, позволяющие точнее установить фертильность биоматериала.

Подготовка к ЭКО при патологиях эндометрия

При заболеваниях слизистой оболочки матки пациентка проходит более сложный и продолжительный курс терапии. Первый этап направлен на устранение первичной патологии, которое вызвало негативные изменения в тканях. Например, большое значение при подготовке к ЭКО при хроническом эндометрите имеет прием:

• противовоспалительных и антибактериальных, противовирусных препаратов, которые препятствуют дальнейшему поражению тканей слизистой;
• иммуномодулирующих и антиоксидантных лекарств, улучшающих сопротивляемость организма инфекционным агентам;
• антикоагулянты и препараты, улучшающие кровоснабжение матки и ее слизистой оболочки;
• витамины и минеральные комплексы, оказывающие общеукрепляющее воздействие, стимулирующие рост здоровой эндометриальной ткани.

При эндометриозе, напротив, требуется удаление излишков эндометриальной ткани. Для этого используются хирургические методы в комплексе с препаратами, подавляющими патологический рост слизистой, нормализующих гормональный фон, эндокринную функцию организма и т. д. Сегодняшние технологии позволяют удалить разросшиеся участки эндометрия с минимальными побочными эффектами – например, с помощью электро- или криодеструкции, лазерной вапоризации. В отличие от традиционной хирургической резекции они моментально коагулируют кровеносные сосуды, тем самым предотвращая маточные кровотечения или инфицирование органа.

Для точного выявления патологий проводится гистероскопия эндометрия перед ЭКО. Этот метод исследования заключается в визуальной оценке состояния слизистой с помощью тонкого трубчатого инструмента с оптической или электронно-оптической системой. Она может проводиться одновременно с удалением новообразований с помощью введенного через гистероскоп скальпеля специальной конструкции. Гистероскопия часто дополняется перед ЭКО биопсией эндометрия (извлечением образца ткани для изучения), УЗИ матки и другими способами диагностики.

Короткий протокол ЭКО по дням

Схема стимуляции подбирается врачом индивидуально для каждой женщины. Всего существует два вида коротких протокола:

• с агонистами ГнГРГ;
• с антагонистами ГнГРГ.

ГнГРГ — это гонадотропин-рилизинг-гормон, воздействующий на гипофиз и вызывающий тем самым выработку лютеинизирующего и фолликулостимулирующего гормона.

В зависимости от выбранного варианта процесс по дням будет различаться.

График подбирается индивидуально

Схема короткого протокола с агонистами ГнГРГ по дням

• на 2–3 день менструального цикла начинается прием препаратов с агонистами ГнГРГ для блокады гипофиза;
• стимуляция овуляции происходит параллельно блокаде гипофиза и занимает около 15 дней;
• за 36 часов до начала пункции фолликулов пациентке вводят дозу гормона ХГЧ;
• На 12–15 день ССО проводится пункция.

Далее следует изъятие яйцеклетки под наркозом. В специальных условиях врач проводит искусственное оплодотворение и выращивание эмбрионов в инкубаторе. Для поддержания необходимого гормонального фона женщине назначаются препараты с прогестероном. Через 3–4 дня подросший эмбрион пересаживают в матку.

Схема короткого протокола с антагонистами ГнГРГ по дням

• на 2–3 день менструального цикла начинают стимуляцию овуляции препаратами с антагонистами ГнГРГ. Весь процесс длится около 14 дней;
• ХГЧ вводится за 36 часов до пункции фолликула;
• на 12–14 день ССО проводится пункция.

Последующие этапы не отличаются от предыдущего варианта.

В целом короткий протокол длится 4 недели, как стандартный менструальный цикл. Препараты принимаются строго с определенным промежутком и в указанных дозировках

Важно понимать, что гормональные лекарства могут оказывать сильное воздействие на настроение, вызывать боли или неприятные ощущения в яичниках.

Короткий протокол подразумевает регулярное обследование

Помимо описанных этапов пациентке необходимо проходить регулярное обследование. Через каждые два дня проводится УЗИ для отслеживания созревания фолликулов.

После пересадки эмбриона в матку пациентке также следует регулярно посещать репродуктолога и соблюдать рекомендации. Только через 20 дней после переноса делается контрольный анализ, способный подтвердить наличие беременности.

Как улучшить эндометрий перед ЭКО

Если у пациентки не диагностированы патологии слизистой матки, ее подготовка к экстракорпоральному оплодотворению включает только прием гормональных препаратов и вспомогательных веществ. Терапия проводится в несколько этапов:

• Препараты эстрадиола. Этот стероидный гормон (эстроген) вырабатывается фолликулярным аппаратом яичников. Он улучшает маточное кровообращение, увеличивает толщину эндометрия, нормализует менструальный цикл женщины, стимулирует синтез других женских половых гормонов.
• Препараты прогестерона. Назначение этого стероидного гормона – перевод эндометрия в «секреторную» стадию, уменьшение иммунного ответа матери на эмбрион (являющийся наполовину чужеродным организмом), замедляет деление эндометриальных клеток. Прогестеронновая терапия проводится как перед ЭКО, так и после, для лучшего закрепления плодного яйца в матке.

Помимо гормональной терапии, в рамках подготовки к ЭКО пациентке назначается прием витаминно-минеральных комплексов, содержащих витамины группы В, витамины А, Е, С, цинк, железо, магнием и другими нужными элементами. Для коррекции состояния эндометрия врач также прописывает препараты, улучшающие кровоснабжение матки.